DNA prep, gel electrophoresis, Southern blotting
DNA를 분리하고, gel electrophoresis와 Southern blotting을 순서대로 실시했다. 먼저 DNA를 얻기 위해 DNA를 정제했다. E.coli에 Sol I, II, III를 처리하여 세포벽과 세포막을 깨고, 그 외 단백질과 균의 genomic DNA를 제거하고 kit를 이용해 순수하게 plasmid DNA를 분리했고, C.elegans에 위 시약과 유사한 역할을 하는 ATL buffer, proteinase K, AL buffer 등을 통해 단백질, 세포막을 제거하고, 100% ETOH로 DNA를 침전시켜 genomic DNA를 얻었다. 이렇게 순수 분리한 DNA의 size를 알아내기 위해 Agarose gel 전기영동을 실시했다. 전기영동을 하기 전에 cuvette에 100㎕로..
2010. 4. 18.
